Per poter seguire il corso e comprenderne i contenuti si presuppone che lo studente abbia conoscenze approfondite degli argomenti trattati nei corsi di Genetica, Biochimica e Biologia Molecolare
Fornire agli studenti una conoscenza dettagliata delle tecnologie del DNA ricombinante, con particolare riguardo a quelle introdotte recentemente, e delle loro applicazioni in ambito biotecnologico.
Genoteche, tipologie e utilizzi. Next Generation Sequencing. Sintesi chimica di DNA. Sistemi per l’espressione di proteine ricombinanti. E. coli come ospite di riferimento. Problematiche per la produzione ottimale di proteine in sistemi eterologhi. Purificazione mediante tags di affinità, da corpi inclusi, per secrezione. Sistemi di espressione in lievito e in cellule di insetto (Baculovirus e Bacmidi). Sistemi di espressione in cellule coltivate di mammifero. Tecniche per la mutagenesi: dalla tradizionale mutagenesi sito-specifica agli approcci integrati di molecular breeding ed evoluzione guidata. Protein engineering, principi e campi di applicazione. Esempi di proteine modificate per utilizzi in biotecnologie e in campo biomedico. Gene e genome targeting: ricombinanzione omologa, ricombinazione sito specifica, ZFN, TALENS e sistemi CRISPR-Cas. DNA therapeutics. Metagenomica. Richiamo delle tecniche usate per generare animali transgenici. Esempi di applicazione di animali transgenici nelle biotecnologie.
Il corso è costituito da lezioni frontali con proiezioni powerpoint. A seconda degli argomenti affrontati, saranno oggetto di lezione e commento in classe articoli scientifici recuperati da database pubblici.
Molecular Biotechnology. Principles and Applications of Recombinant DNA 4th edition 2010.
Glyck BR, Pasternak JJ, Pattern CL. ASM Press, Washington.
Verranno utilizzati lavori scientifici per introdurre e commentare approcci e tecnologie innovativi o
particolarmente significativi.
L'esame finale consiste in una prova orale sul programma del corso.
Il corso ha uno spazio dedicato sul portale per didattica Kiro, a cui gli studenti possono accedere previo login con le loro credenziali di Ateneo: http://elearning2.unipv.it/bio/course/view.php?id=16