LABORATORIO DI METODOLOGIE CELLULARI
2015/2016
2017/2018
DM270
BIO/13 (BIOLOGIA APPLICATA)
DIPARTIMENTO DI BIOLOGIA E BIOTECNOLOGIE "LAZZARO SPALLANZANI"
SCIENZE BIOLOGICHE
PERCORSO COMUNE
PRIMO SEMESTRE (01/10/2017 - 14/01/2018)
6
72 ore di attività frontale
Italiano
ORALE
RAIMONDI ELENA MARIA (titolare) - 3 CFU
BOTTIROLI GIOVANNI - 3 CFU
Nozioni di base di Genetica, Citologia e Istologia.
Fondamenti di microscopia e di citogenetica.
Modulo 1. Principi basilari di microscopia ottica. Principali tipi di microscopia ottica (luce trasmessa, luce riflessa, campo scuro, di polarizzazione, contrasto di fase e interferenziale, fluorescenza) e loro campi di applicazione. Cenni di microscopia confocale, microscopia a due fotoni e microscopia a forza atomica. La fluorescenza come fenomeno foto-fisico: spettri di eccitazione/emissione, efficienza quantica e tempo di decadimento. Tecniche fluorimetriche nello studio di cellule e tessuti: fluorescenza naturale e fluorescenza indotta. I fluorocromi come marker di strutture e funzioni cellulari. Tecniche di immunofluorescenza.
Modulo 2. Colture in vitro di cellule somatiche di mammifero. Colture in vitro da sangue periferico. Allestimento di preparati cromosomici. Bandeggi cromosomici. Il cariotipo umano normale e patologico. Ricostruzione del cariotipo umano. Colorazione differenziale di cromatidi fratelli: SCE. Marcatura di sonde di DNA: nick-translation. Ibridazione in situ in fluorescenza. Evidenziazione delle sonde. Analisi dei risultati sperimentali al microscopio ottico in fluorescenza. Uso di telecamera ad alta definizione (CCD). Acquisizione ed elaborazione di immagini digitali.
Laboratori didattici
Dispense con le diapositive presentate durante le esercitazioni.
Prova scritta sugli esperimenti svolti.