2019/2020

2021/2022

DM270

BIO/12 (BIOCHIMICA CLINICA E BIOLOGIA MOLECOLARE CLINICA)

DIPARTIMENTO DI BIOLOGIA E BIOTECNOLOGIE "LAZZARO SPALLANZANI"

BIOTECNOLOGIE

PERCORSO COMUNE

3°

Secondo Semestre (01/03/2022 - 14/06/2022)

6

48 ore di attività frontale

Italiano

SCRITTO

PALLADINI GIOVANNI (titolare) - 3 CFU
NUVOLONE MARIO ULISSE - 3 CFU

=

Lo studente
1) conoscerà le principali tecniche di biologia molecolare per l’estrazione, amplificazione e analisi degli acidi nucleici
2) conoscerà le principali applicazioni inerenti la diagnostica molecolare e gli aspetti di base della logista diagnostica

1. Fondamenti di logica diagnostica
2. Tecniche di estrazione degli acidi nucleici
3. Tecniche di quantificazione degli acidi nucleici
4. Controllo di qualità degli acidi nucleici
5. Tecniche di amplificazione degli acidi nucleici: principi generali, tipologie principali
6. Reazione a catena della polimerasi: principi generali, disegno sperimentale, considerazioni tecniche, principali applicazioni
7. Varianti della PCR: Hot start PCR, Touch down PCR, Nested PCR, Multiplex PCR, Inverse PCR, Direct PCR, GC-rich PCR, Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), Quantitative polymerase chain reaction (qPCR), real time qPCR, Reverse transcriptase qPCR (RT-qPCR), digital PCR
8. Tecniche di elettroforesi degli acidi nucleici
9. Analisi dei polimorfismi di lunghezza dei frammenti di restrizione (RFLP)
10. PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP)
11. Analisi ad alta risoluzione della curva di melting
12. Microarrays: chip per single variant nucleotidiche (SNV chips), microarrays per studi di espressione genica, arrays per ibridizzazione genomica comparativa (aCGH)
13. Ibridizzazione In situ: Ibridizzazione in situ con fluorescenza (FISH), cariotipo spettrale (SKY)
14. Sequenziamento mediante reazione di terminazione con dideossinucleotidi (sequenziamento Sanger)
15. Tecniche di sequenziamento parallelo massivo: principi generali
16. Amplificazione a ponte e sequenziamento mediante impiego di terminatori reversibili marcati con composti fluorescenti
17. Sequenziamento real time di single molecule di DNA mediante impiego di nucleotidi fluorescenti
18. Metodologie di arricchimento di regioni target per sequenziamento parallelo massivo
19. Sequenziamento dell’intero esoma (WES)
20. Applicazione della diagnostica molecolare: esempi clinici

- Lezioni frontali
- Discussione di scenari di laboratorio

Tietz textbook of Clinical Chemistry and molecular diagnotics

Ciaccio Lippi - Biochimica Clinica e Medicina di Laboratorio

Esame scritto (quiz a risposta multipla)

Esame scritto (quiz a risposta multipla)

NA
$lbl_legenda_sviluppo_sostenibile