METODOLOGIA DIAGNOSTICA MOLECOLARE
2018/2019
2020/2021
DM270
BIO/12 (BIOCHIMICA CLINICA E BIOLOGIA MOLECOLARE CLINICA)
DIPARTIMENTO DI MEDICINA MOLECOLARE
TECNICHE DI LABORATORIO BIOMEDICO (ABILITANTE ALLA PROFESSIONE SANITARIA DI TECNICO DI LABORATORIO BIOMEDICO)
PERCORSO COMUNE
PRIMO SEMESTRE (01/10/2020 - 22/01/2021)
3
24 ore di attività frontale
ITALIANO
SCRITTO
NUVOLONE MARIO ULISSE - 2 CFU
NUVOLONE MARIO ULISSE - 1 CFU
=
Lo studente
1) conoscerà le principali tecniche di biologia molecolare per l’estrazione, amplificazione e analisi degli acidi nucleici
2) conoscerà le principali applicazioni inerenti la diagnostica molecolare
1. Tecniche di estrazione degli acidi nucleici
2. Tecniche di quantificazione degli acidi nucleici
3. Controllo di qualità degli acidi nucleici
4. Tecniche di amplificazione degli acidi nucleici: principi generali, tipologie principali
5. Reazione a catena della polimerasi: principi generali, disegno sperimentale, considerazioni tecniche, principali applicazioni
6. Varianti della PCR: Hot start PCR, Touch down PCR, Nested PCR, Multiplex PCR, Inverse PCR, Direct PCR, GC-rich PCR, Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), Quantitative polymerase chain reaction (qPCR), real time qPCR, Reverse transcriptase qPCR (RT-qPCR), digital PCR
7. Tecniche di elettroforesi degli acidi nucleici
8. Analisi dei polimorfismi di lunghezza dei frammenti di restrizione (RFLP)
9. PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP)
10. Analisi ad alta risoluzione della curva di melting
11. Microarrays: chip per single variant nucleotidiche (SNV chips), microarrays per studi di espressione genica, arrays per ibridizzazione genomica comparativa (aCGH)
12. Ibridizzazione In situ: Ibridizzazione in situ con fluorescenza (FISH), cariotipo spettrale (SKY)
13. Sequenziamento mediante reazione di terminazione con dideossinucleotidi (sequenziamento Sanger)
14. Tecniche di sequenziamento parallelo massivo: principi generali
15. Amplificazione a ponte e sequenziamento mediante impiego di terminatori reversibili marcati con composti fluorescenti
16. Sequenziamento real time di single molecule di DNA mediante impiego di nucleotidi fluorescenti
17. Metodologie di arricchimento di regioni target per sequenziamento parallelo massivo
18. Sequenziamento dell’intero esoma (WES)
• Lezioni frontali

Discussione di casi in laboratorio
Elisabetta Albi
Biochimica Clinica Essenziale
Zanichelli
Esame scritto (qui a risposta multipla)