METODOLOGIE BIOCHIMICHE
2015/2016
2016/2017
DM270
BIO/12 (BIOCHIMICA CLINICA E BIOLOGIA MOLECOLARE CLINICA)
DIPARTIMENTO DI MEDICINA MOLECOLARE
TECNICHE DI LABORATORIO BIOMEDICO (ABILITANTE ALLA PROFESSIONE SANITARIA DI TECNICO DI LABORATORIO BIOMEDICO)
PERCORSO COMUNE
PRIMO SEMESTRE (03/10/2016 - 13/01/2017)
2
16 ore di attività frontale
ITALIANO
ORALE
CAMPAGNOLI MONICA - 2 CFU
Conoscenza della chimica e della biochimica di base
Vengono fornite allo studente conoscenze sulle principali tecniche utilizzate nei laboratori di biochimica per la purificazione e la caratterizzazione di molecole biologiche.In particolare il corso è incentrato sull'apprendimento dei principi di base teorico-pratici delle tecniche spettroscopiche, cromatografiche ed elettroforetiche.
Principi di base: Massa, volume, soluzioni, concentrazione, il pH.
Preparazione di soluzioni, tamponi ed uso della strumentazione di base di un laboratorio.
Acqua deionizzata e MilliQ.
Tecniche spettroscopiche: Principi teorici generali: proprietà della radiazione elettromagnetica, interazione con la materia.
Spettroscopia nell’UV e visibile: principi teorici, legge di Lambert-Beer, strumentazione, applicazioni. Spettrofluorimetria, Colorimetria.
Tecniche Cromatografiche: Principi generali.
Cromatografia a bassa pressione e ad alta pressione (HPLC)
Cromatografia a esclusone molecolare (Gel filtrazione)
Cromatografia a scambio ionico
Cromatografia di affinità
Criteri di scelta di un sistema cromatografico.
Tecniche Elettroforetiche: Principi generali
Materiali di supporto: Agarosio, Poliacrilammide
Elettroforesi delle proteine: SDS-PAGE, elettroforesi in condizioni native, Isoelettrofocalizzazione (IEF), Elettroforesi bidimensionale(2-D PAGE)
Metodi di colorazione e rivelazione
Western blotting
Elettroforesi del DNA su gel di agarosio
Elettroforesi capillare (cenni)
Lezione frontale.
Esame orale.